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5-21高效液相色譜系統(tǒng)作為現(xiàn)代分析化學(xué)中的重要工具,以其高分辨率、高靈敏度和廣泛適用性,在生物化學(xué)、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析等多個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮著關(guān)鍵作用。該系統(tǒng)主要由輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)五大部分組成。輸液系統(tǒng)是高效液相色譜系統(tǒng)的動(dòng)力源泉,負(fù)責(zé)將流動(dòng)相以穩(wěn)定且可控的...
紫外檢測(cè)器(UV),是基于溶質(zhì)分子吸收紫外光的原理設(shè)計(jì)的檢測(cè)器。因?yàn)榇蟛糠殖R?jiàn)有機(jī)物質(zhì)和部分無(wú)機(jī)物質(zhì)都具有紫外吸收性質(zhì),所以該檢測(cè)器是液相色譜中應(yīng)用較廣泛的檢測(cè)器。紫外檢測(cè)器的工作原理是Lambert-Beer定律,即當(dāng)一束單色光透過(guò)流動(dòng)池時(shí),若流動(dòng)相不吸收光,則吸收度A與吸光組分的濃度C和流動(dòng)池的光徑長(zhǎng)度L成正比。紫外檢測(cè)器有較好的選擇性和較高的靈敏度,而且對(duì)環(huán)境溫度、流動(dòng)相組成變化和流速波動(dòng)不太敏感,因此既可用于等度洗脫,也可用于梯度洗脫。除有具有較好的選擇性和較高的靈敏...
高效液相色譜是將氣相色譜與經(jīng)典液相色譜相結(jié)合發(fā)展起來(lái)的新型的分離、分析技術(shù)。具有分離技術(shù)效能高、檢測(cè)靈敏度高、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)。它在醫(yī)藥、環(huán)境保護(hù)、食品工業(yè)、農(nóng)業(yè)、石化等領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。高效液相色譜儀是利用混合物中各組份在不同的兩相中溶解,分配,吸附等作用性能的差異,當(dāng)兩相作相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí),使各組分在兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達(dá)到相互分離,從而按一定次序由固定相中先后流出。與適當(dāng)?shù)闹髾z測(cè)方法結(jié)合,實(shí)現(xiàn)混合物中各組分的分離與檢測(cè)。兩相中有一相是固定的,叫做固定相,即色譜...
在高效液相色譜使用過(guò)程中,經(jīng)常會(huì)遇到一些操作及維護(hù)問(wèn)題,為使HPLC系統(tǒng)良好運(yùn)行,其中一個(gè)很重要的事情就是保持系統(tǒng)的清潔。因此,應(yīng)關(guān)注流動(dòng)相流經(jīng)該系統(tǒng)的所有地方,對(duì)于這些地方經(jīng)常性的沖洗。1、流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶首先要經(jīng)常清洗流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶,或者每做一批新樣品更換一次流動(dòng)相。一個(gè)臟的儲(chǔ)液瓶將會(huì)污染注入的流動(dòng)相。建議儲(chǔ)液瓶中緩沖液使用時(shí)間不要超過(guò)一周,而有機(jī)溶劑使用時(shí)間不要超過(guò)一個(gè)月。也有人建議儲(chǔ)液瓶中保持用溶劑充滿,直到更換分析方法儲(chǔ)液瓶需更換新溶劑(流動(dòng)相組成發(fā)生變化)時(shí),將舊溶劑倒...
液相色譜儀檢測(cè)器根據(jù)適用范圍可以分為:專用型檢測(cè)器和通用型檢測(cè)器。專用型檢測(cè)器用以測(cè)量被分離試樣樣品組分某種特性的變化,專用型檢測(cè)器對(duì)樣品中組分的某種化學(xué)或物理性質(zhì)特別敏感,而這一性質(zhì)也是流動(dòng)相所不具備的或至少在操作條件下不能顯示出來(lái)的。專用型檢測(cè)器靈敏度高,受外界環(huán)境影響和操作條件變化小,并且可用于色譜儀的梯度洗脫操作。但總體性能與通用型檢測(cè)器相比,其應(yīng)用范圍會(huì)受到一定的限制。通用型檢測(cè)器可連續(xù)測(cè)量色譜柱的流出物包括流動(dòng)相和試樣樣品組分的全部特性變化,通常一般會(huì)采用差分測(cè)量...
高效液相色譜儀是應(yīng)用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它是由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。目前可廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。下面我們就來(lái)了解一下高效液相色譜儀的操作方法!高效液相色譜儀的操作步驟:1、過(guò)濾流動(dòng)相,根據(jù)需要選擇不同的濾膜(0.45um)。2、對(duì)抽濾后的流動(dòng)相進(jìn)行超聲脫氣10-20分鐘。3、打開(kāi)HPLC工作站,連接好流動(dòng)相管道,連接檢測(cè)系統(tǒng)。4、進(jìn)入HP...
與傳統(tǒng)的高效液相色譜(HPLC)相比,超高效液相色譜(ultra-performanceliquidchromatography,UPLC)具有高分離度(ultraresolution)、高速度(ultraspeed)、高靈敏度(sensitivity)等優(yōu)勢(shì)。在全面提升HPLC的速度、靈敏度和分離度諸品質(zhì)的同時(shí),保留其原有的實(shí)用性及原理。優(yōu)勢(shì)有:(1)通過(guò)小粒徑色譜柱(UPLC色譜柱通常采用1.7μm粒徑填料,HPLC色譜柱通常采用5.0μm粒徑填料)增加單位長(zhǎng)度內(nèi)的理論塔...
國(guó)產(chǎn)液相色譜儀是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離分析技術(shù)。它既能用于微量組分的分析測(cè)定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應(yīng)用范圍已超過(guò)其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長(zhǎng),為推動(dòng)該領(lǐng)域的進(jìn)步和發(fā)展作出了巨大貢獻(xiàn)。國(guó)產(chǎn)液相色譜儀通常都被認(rèn)為和大容量色譜柱和高流速有關(guān)聯(lián)的。然而并不是以設(shè)備的大小和系統(tǒng)消耗的流動(dòng)相的多少來(lái)決定制備液相色譜,而是依據(jù)分離目的來(lái)決定。分析液相的目的是給一種組份進(jìn)行定量和定性。制備液相的目的是對(duì)產(chǎn)品的單...
檢測(cè)器是高效液相色譜儀的核心部件,它負(fù)責(zé)把從色譜柱分離出來(lái)的各組分快速、準(zhǔn)確的檢測(cè)出來(lái),實(shí)現(xiàn)定性、定量分析。檢測(cè)器分類:A.選擇性檢測(cè)器:組分性質(zhì)1、紫外可見(jiàn)吸收檢測(cè)器(UVD)紫外吸收檢測(cè)器是目前液相色譜儀中應(yīng)用廣泛的檢測(cè)器,它靈敏度高,線性范圍寬,但要求被檢測(cè)樣品組分有紫外吸收或衍生后有紫外吸收,屬于選擇性檢測(cè)器。特點(diǎn):靈敏度較高,線性范圍寬,噪聲低,波長(zhǎng)可選,對(duì)流動(dòng)相的流速和溫度變化不敏感,適用于梯度洗脫,對(duì)強(qiáng)吸收物質(zhì)檢測(cè)限可達(dá)10-9g/ml以下,檢測(cè)后不破壞樣品,可...
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